第一代DNA測序技術(shù)用的是1975年由桑格(Sanger)和考爾森(Coulson)開創(chuàng)的鏈終止法或者是1976-1977年由馬克西姆(Maxam)和吉爾伯特(Gilbert)發(fā)明的化學(xué)法(鏈降解). 并在1977年,桑格測定了第一個基因組序列,是噬菌體X174的,全長5375個堿基1。自此,人類獲得了窺探生命遺傳差異本質(zhì)的能力,并以此為開端步入基因組學(xué)時代。研究人員在Sanger法的多年實踐之中不斷對其進(jìn)行改進(jìn)。在2001年,完成的首個人類基因組圖譜就是以改進(jìn)了的Sanger法為其測序基礎(chǔ),Sanger法核心原理是:由于ddNTP的2’和3’都不含羥基,其在DNA的合成過程中不能形成磷酸二酯鍵,因此可以用來中斷DNA合成反應(yīng),在4個DNA合成反應(yīng)體系中分別加入一定比例帶有放射性同位素標(biāo)記的ddNTP(分為:ddATP,ddCTP,ddGTP和ddTTP),通過凝膠電泳和放射自顯影后可以根據(jù)電泳帶的位置確定待測分子的DNA序列。
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